کمّی سازی سطح پیکوگرم برخی از هورمونهای رشد در ادرار گاو

 مطالعه حاضر به توسعه و استفاده از روش میکرواستخراج قطره ای حباب در قطره ترکیب شده با حلال (BID-SDME) برای غنی سازی هورمون استیلبن[1] در نمونه های ادرار گاو می­پردازد. هورمون ها با استفاده از دستگاه GC-MS به صورت خطی با ضریب تعیین (R2) از 0.999 و 0.999 برای hexestrol و دی اتیل استیل بسترول، در محدوده غلظت 0.05-10 NGML-1، کمی سازی شد. دقت عالی (RSD<10٪) و دقت (با استفاده از یک ادرار مرجع گاو) به دست آمد. ارزش قابلیت تشخیص مشاهده (CCα یا LOD) 0.01 نانوگرم در میلی لیتر (هگزاسترول)، 0.03 نانوگرم در میلی­لیتر (سیس دی اتیل استیل بسترول) و 0.02 نانوگرم در میلی لیتر (ترانس دی اتیل استیل بسترول)، بود در حالی که ارزشهای حد تصمیم (CCβ یا LOQ)  0.03 نانوگرم در میلی لیتر و 0.07 و 0.08نانوگرم در میلی لیتر، بود که قابل مقایسه با یا بهتر از آنچه در مقالات گزارش شده بودند. نکته مهم، دستکاری نمونه است به طور قابل توجهی با استفاده از روش ما ساده شده و ارزش های غنی سازی تا حد زیادی افزایش یافته است. نتایج نشان میدهد که یک مخلوط 3:1 کلروفرم / تولوئن بالاترین بازده استخراج با نسبت کاهش حباب از 2: 1 داد. ما اهمیت تراکم حلال را در موفقیت روش BID-SDME برجسته کردیم.

[1] - stilbene

abstract

Growth hormones are important biologically active compounds. However, they can cause deleterious effects if not used with care and their use in farmed animals is banned in the European Union. This study presents the development and application of a mixed-solvent “bubble-in-drop single drop micro-extraction” (BID–SDME) method for enrichment of stilbene hormones in bovine urine samples. The hormones are quantified using GC–MS showing good linearity with the coefficient of determination (R2 ) of 0.999 and 0.999 for hexestrol and diethylstilbestrol, respectively, in the concentration range 0.05–10 ng mL–1 . Excellent precision (RSDo10%) and accuracy (using a bovine urine certified reference material) were obtained. The observed detection capability (CCα, or LOD) values were 0.01 ng mL–1 (hexestrol), 0.03 ng mL–1 (cis-diethylstilbestrol) and 0.02 ng mL1 (trans-diethylstilbestrol), respectively, while the decision limit (CCβ, or LOQ) values were 0.03 ng mL1 , 0.08 ng mL1 and 0.07 ng mL–1 , which are comparable to or better than those reported in literature. Importantly, sample handling is significantly simplified by our method and enrichment values are greatly enhanced. The results show that a 3:1 chloroform/toluene mixture gave the highest extraction efficiency with a drop-bubble ratio of 2:1. We highlight the importance of solvent density on the success of the BID–SDME method.